石蠟包埋步驟 完成切片的制作流程 石蠟切片制作 切片制備
發布時間:2019/07/26
一、組織固定
按1:20將組織放入固定液。
二、組織脫水、滲透與包埋
1、組織脫水:
70% 乙醇(30min)→85%乙醇(30min) →95%乙醇(30min)→100%乙醇(30min)→100%乙醇(30min)。
需要注意的問題:
(1)若組織數量過多時,應分開脫水;
(2)脫水的體積至少為組織體積的4倍;
(3)乙醇純度越高時,脫水的時間減少,否則引起組織過硬;
(4)最好能攪拌,使脫水充分;
2、透明:
二甲苯I (30min)→二甲苯II(30min)。
需要注意的問題:
在二甲苯的時間不宜過短或過長。時間過短引起透明不充分,影響后面滲透包埋;時間過長則引起組織變脆。
3、滲透:
石蠟1 (60min)→石蠟2(60min)→石蠟3(60min)
三、包埋
將組織放入在包埋模中,放上包埋盒,用包埋機熱臺進行包埋。將包埋好的組織放在石蠟包埋機的冷臺上冷卻。
需要注意的問題:
包埋時,注意一定要等冷卻好后才取下包埋盒,不然石蠟容易粘在包埋模上。
四、石蠟切片
將包埋好的組織于石蠟切片機上進行切片,切片厚度約4μm。
五、攤片、烤片
將切好的組織蠟片,放于漂片機中展開,再將切片撈于載玻片上,進行烤片。